WWW.KNIGI.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS


Pages:     | 1 |   ...   | 47 | 48 || 50 | 51 |   ...   | 57 |

«Редакционная коллегия: С. Л. Дземешкевич, О. Г. Скипенко, Л. В. Захарьянц, Е. В. Рогачкова СОДЕРЖАНИЕ РОССИЙСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ХИРУРГИИ ИМ. АКАДЕМИКА Б. В. ПЕТРОВСКОГО ...»

-- [ Страница 49 ] --

Данная концепция вполне согласуется с теорией Фриденштейна о су

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

ществовании детерменированных остеогенных клеток предшест венников, облигатно дифференцирующихся в остеобласты, и инду цибельных клеток, которые при сочетании определенных местных условий способны стать костными клетками [15].

Современное развитие представлений о влиянии мезенхималь ных стволовых клеток (МСК) на остеорепарацию, об их биологии, возможности их культивирования для использования в лечебных целях побудило исследователей к разработке и изучению как эффективности, так и методов применения культивированных клеток [12].

В мировой практике проводились попытки поместить в зону несращения кости клетки предшественники остеобластов, заклю чавшиеся в трансплантации костного мозга в межотломковую зону [3]. Исследования проф. Тумяна С. Д. (1985) [13] на кроликах по роды шиншилла показали, что на месте имплантированного виталь ного аутологичного костного мозга происходит гистогенез костной ткани. Красный костный мозг, будучи остеогенетически тесно свя занным с костной тканью, кроме кроветворной функции, обладает еще и остеогенными свойствами. Кроме того, стромальные элемен ты костного мозга являются детерминированными остеогенными клетками предшественниками. Однако этот метод давал весьма противоречивые результаты.

Позднее, из 5 дневной бластоцисты человека были получены эмбриональные стволовые клетки. [22]. Это стало следующим эта пом изучения культивированных клеток скелетогенной мезенхимы человеческих плодов.

Открытие стволовых клеток позволило получить новые перспек тивы для более глубокого исследования процессов развития, диф ференцировки, регенерации и лечения последствий тяжелых кост ных повреждений.

Имеющиеся в настоящее время работы по изучению и примене нию стволовых клеток при различной костной патологии показали перспективность их использования, но в то же время поставили перед исследователями множество новых нерешенных вопросов.

В частности, не решен вопрос о показаниях к применению, опти мальных путях и сроках введения клеточного материала, необхо димость использования и состав искусственных материалов в каче стве матрицы носителя [9]. Некоторые вопросы мы попытались затронуть в этой работе.

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

ОС Н О В Н А Я Ч АС Т Ь

Работа включала экспериментальное и клиническое направления.

В клинике изучали влияние аутологичных мезенхимальных стволовых клеток (МСК) костного мозга на течение остеорепара ции и сроки лечения больных с последствиями травм конечностей и нарушением остеорепарации.

В группу исследуемых вошли четверо пациентов (женщин) в воз расте от 25 до 60 лет с нарушением остеорепарации, которую выявля ли по клинико рентгенологическим признакам. Все пациенты пере несли высококинетическую травму конечностей, сопровождавшуюся повреждением магистральных сосудов с формированием обширных рубцов и деформаций мягких тканей пораженного сегмента. У троих больных были повреждены периферические нервы. Все больные пере несли хирургическое лечение по поводу хронического травматическо го остеомиелита с последующей ремиссией более 1,5 лет.

До поступления трое пациентов были неоднократно оперирова ны с применением традиционных методов лечения по поводу лож ного сустава длинной трубчатой кости, из них двое безуспешно с формированием атрофических ложных суставов. У 1 пациентки ложный сустав сросся на фоне укорочения голени порядка 5 см.

У 1 пациентки после тяжелой термомеханической травмы верхней конечности с обширным размозжением тканей и множественными открытыми переломами в раннем периоде сформировался некроз костных фрагментов с последующим образованием обширного де фекта мягких тканей и обеих костей предплечья. В последующем дефект мягких тканей был устранен свободным реваскуляризиро ванным кожно мышечным аутотрансплантатом. У 1 больной с лож ным суставом сопутствующим был инсулинзависимый сахарный диабет II типа.

По данным радиоизотопного исследования отмечали снижение перфузии мышц пораженной конечности.

С учетом клинико рентгенологической картины, до операции у троих больных был забран костный мозг для выращивания культу ры аутологичных МСК.

В ходе операции с открытой репозицией и остеосинтезом у двоих больных с ложными суставами и у одной с протяженным де фектом костей предплечья выявлен склероз концов костных фраг ментов с грубыми рубцовыми изменениями окружающих тканей.

Больной с дефектом костей предплечья дефект устранен свобод ным реваскуляризированным малоберцовым аутотрансплантатом

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

в условиях наружного остеосинтеза с контактом дистального конца аутотрансплантата с коротким склерозированным фрагментом лучевой кости.

У одной больной с укорочением голени выполняли дистракцион ный остеосинтез на уровне диафиза с учетом выбора области с наименьшим поражением тканей. Остеотомия была выполнена под надкостнично. Дистракцию проводили по общепринятой методи ке. На фоне стабилизации в аппарате развились явления сущест венного замедления созревания регенерата с полиморфной рентге нологической картиной, напоминающей пятнистый остеопороз с формированием сужения регенерата в зоне роста в виде «песочных часов» и нарастающей потерей плотности. Забор костного мозга выполнен по выявлении нарушения остеорепарации.



Забор костного мозга из тела гребня подвздошной кости выпол няли в условиях операционной под спинальной или эпидуральной анестезией по стандартной методике. Общий объем забираемой ткани составлял 250 мл.

Клетки культивировали в стандартных условиях в селективных культуральных средах (ЗАО «РеМеТэкс». Ген. директор Гольд штейн Д. В.).

Перед клиническим использованием аутологичных МСК прово дили контроль соответствия требованиям, среди которых выявляли стерильность, цитогенетическое соответствие, жизнеспособность после разморозки. Все культуры были стерильны. Хромосомный на бор соответствовал норме, анеуплоидия не более 2%, хромосомные аберрации не более 2%, жизнеспособность после заморозки по три пановому синему не менее 95%.

Культуру вводили в стерильных условиях в объеме от 2 до 3 мл в количестве 250—500 млн инъекционно иглой для спинальной анес тезии в область контакта костных фрагментов у трех больных и у одной – в область разрежения костного регенерата, продвигая иглу в момент введения по поверхности кости (рис. 1). Начальное положение и направление перемещения иглы контролировали с помощью электронно оптического преобразователя, после чего проводили введение культуры. Больной после устранения дефекта костей предплечья малоберцовым свободным реваскуляризирован ным костным аутотрансплантатом введение культуры выполнено в область контакта дистального конца аутотрансплантата с коротким склерозированным костным фрагментом лучевой кости.

Экспериментальное исследование проводили в двух направлени ях. На животных проводили сравнительное изучение способности

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

Рис. 1. Инфузия МСК в область ложного сустава.

к биоинтеграции гидроксиаппатита (ГАП), биоситалла и керами ки+биоситалла. In vitro изучали адгезию МСК на поверхности и внутри исследуемых материалов. Материалы получены РХТУ им.

Менделеева и ИПК РАН.

Плотность материалов у ситаллов и керамики на основе ситаллов составляла изг = 100—160 МПа, что сопоставимо с прочностными свойствами кости ( изг = 120–180 МПа). Пористость и размеры пор также удовлетворяли предъявляемым требованиям – размеры пор от 50 до 500 мкм, пористость от 70% до 90%.

Работу проводили на 12 кроликах породы шиншилла возрастом от 10 месяцев до 1 года. В ходе операции обнажали наружную поверхность диафиза бедренной кости. В кортикальной пластинке формировали каналы сверлом диаметром 3 мм по числу исследуе мых образцов. В сформированные каналы внедряли калиброван ные образцы с их самофиксацией за счет плотного прилегания к стенкам каналов. Рану ушивали послойно с восстановлением цело стности структур. В послеоперационном периоде выполняли кон трольные рентгенограммы в сроки 5—7 суток, 2, 4, 6, 8 месяцев, 1 год. Из эксперимента животных выводили в сроки 2, 4, 6, 8 меся

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

цев, 1 год. Декальцинацию проводили по стандартным методикам в растворе трилона В. Гистологические шлиф срезы толщиной 10 мкм производили через исследуемые образцы и окрашивали гематоксилином и эозином по Ван Гизону. Оценивали гистоло гические срезы при увеличении 50; 100; 200 и 400 (рис. 2, 3).

Для исследования адгезии МСК на материал высевали культивиро ванные клетки и проводили исследование через 3 суток. Образцы промывали фосфатно солевым буфером, фиксировали 2,5% раство ром глютарового альдегида на фосфатно солевом буфере в течении 24 часов и обезвоживали. Высушивание образцов проводили мето дом перехода критической точки жидкого СО2. Образцы покрыва ли слоем золота (10 нм) в аппарате EIKO IB 3 (Япония). Анализ полученных препаратов проводили в сканирующем электронном микроскопе S–570 (Hitachi, Япония) при ускоряющем напряже нии 15 кВ. (рис. 4).

Клетки искали на поверхности образцов и в середине, для чего их разламывали и изучали поверхность разлома.

Р Е З УЛ ЬТ АТ Ы

В ранние сроки у троих больных наблюдали местную реакцию тканей в области введения клеточной культуры в виде гиперемии, у двух больных в виде отека тканей. У двух больных местная реакция сопровождалась гипертермией. На фоне десенсибилизиру ющей терапии и местного применения препаратов с высокой осмо тической активностью явления купированы к 2—4 суткам.

Дальнейшее течение репаративных процессов по рентгеноло гической картине протекало в ожидаемые сроки. По данным радиоизотопного исследования, распределение остеотропного радиофармпрепарата, в сроки после 3 недель после введения куль туры соответствовало особенностям распределения у больных после аналогичных операций с неосложненным течением.

Сроки сращения у больных с ложными суставами диафиза плеча и диафиза голени рентгенологически наблюдали в сроки 4 и 5 месяцев (рис. 5). Сращение обоих концов малоберцового кост ного аутотрансплантата с костными фрагментами костей предплечья наступило через 5 месяцев, что совпадает со сроками сращения дан ного аутотрансплантата в целом по группе аналогичных больных.

По завершению формирования костного регенерата, аппарат снят через 5 месяцев после введения культуры.

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

Рис. 2. Макропрепарат бедренной кости кролика.

На разрезе виден имплантированный материал, проросший новообразованной Рис. 3. Прорастание новообразованной костной тканью материала керамика+биоситалл в сроки 6 месяцев: а) при увеличении 100, б) при увеличении 200 (хорошо видны остеоциты, новообразованная кость).

Рис. 4. Электронная микроскопия. Видна распластанная МСК.

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ТРАВМ СКЕЛЕТА...

Рис. 5. Рентгенологическая картина при поступлении – атрофический ложный сустав правой плечевой кости (а); та же больная через 5 месяцев после введения В процессе морфологических исследований наилучшие резуль таты были получены в группе материалов на основе керамики+ биоситаллов. Уже к 2 месяцам выявляются островки новообразо ванной костной ткани с прорастанием сосудов внутри материала.

К 4 месяцам выявляются цепочки остеобластов на границе старой и новообразованной кости. К 5 месяцам имплантированный матери ал полностью пронизан новообразованной костной тканью с со хранными остеоцитами и цепочками остеобластов.



Pages:     | 1 |   ...   | 47 | 48 || 50 | 51 |   ...   | 57 |
 

Похожие работы:

«Редакторы публикации: Мартин Черны Игорь Федорович Букша Соавторы: Букша Максим Игоревич, Букша Ксения Игоревна, Пастернак Владимир Петрович, Пивовар Татьяна Сергеевна, Яроцкий Владимир Юрьевич, Йана Беранова, Петр Вопенка, Радек Русс При написании книги использовались материалы, подготовленные специалистами: Ткач Людмила Ивановна, Бугайов Сергей Николаевич, Назаренко Виталий Васильевич, Миклуш Степан Иванович, Вицега Руслан Романович, Зибцев Сергей Викторович, Лащенко Андрей Григорьевич,...»

«Перечень массовых мероприятий и выставок ВМУК ЦСГБ на март 2014 г. n/n Название мероприятия Дата Время Кто проводит и где (если вне библ.), участники 1. 2014 год в России 05 12.30 БИБЛИОТЕКА-ФИЛИАЛ №9 март (УЛ. КУЗНЕЦКАЯ, 73); ТЕЛ. Познание мудрости духовных 97-40-67 книг Встреча-диалог 2. 95 лет 05 15.00 БИБЛИОТЕКА-ФИЛИАЛ №29 Царицынскому-Сталинградско март (УЛ. РОССИЙСКАЯ, 16); ТЕЛ. му-Волгоградскому комсомолу 62-01-21 Беспокойные сердца Краеведческий экскурс 3. Абэ Кобо (90 лет со дня 07...»

«Вып. 12. Саранск; Пушта, 2014 НОВЫЕ ДАННЫЕ ПО РЕДКИМ ВИДАМ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ И ПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ МОРДОВИИ С ОБСУЖДЕНИЕМ СТАТУСА ОХРАНЫ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ А.Б. Ручин1, Л.В. Егоров1,2, О.Н. Артаев1, С.К. Алексеев1, Н.А. Завьялов3 1 Мордовский государственный природный заповедник имени П.Г. Смидовича; e-mail: sasha_ruchin@rambler.ru 2 Государственный природный заповедник Присурский; e-mail: platyscelis@mail.ru 3 Государственный природный заповедник Рдейский; e-mail: zavyalov_n@mail.ru Представлены...»

«ВСТУПЛЕНИЕ 3 ТЕНИ 4 Поднос в стиле пэчворк 7 Рождественское ретро-сердечко 25 Кувшин Простая радость 41 РАСТУШЕВКА 55 Художественный декупаж на досочке (пастель) 70 Художественный декупаж на тарелке (акрил и замедлитель) 75 Художественный декупаж: тени красками 81 Декоративная тарелочка Цветы и кружево 88 Пасхальная тарелочка Анютины глазки 99 Подрисовка сложного фона 113 ПОДРИСОВКА И ДОРИСОВКА 137 Превращение пивного стакана в вазу 140 Коробочка для чайных пакетиков Прогулка 152 Тарелка...»

«Хлеб – имя существительное Михаил Алексеев 2 Книга Михаил Алексеев. Хлеб – имя существительное скачана с jokibook.ru заходите, у нас всегда много свежих книг! 3 Книга Михаил Алексеев. Хлеб – имя существительное скачана с jokibook.ru заходите, у нас всегда много свежих книг! Михаил Алексеев Хлеб – имя существительное повесть в новеллах 4 Книга Михаил Алексеев. Хлеб – имя существительное скачана с jokibook.ru заходите, у нас всегда много свежих книг! От автора В каждом – малом, большом ли –...»

«Атлант расправил плечи. Книга 3 ЧАСТЬ ТРЕТЬЯ А ЕСТЬ А Глава 1. Атлантида Открыв глаза, она увидела солнечный свет, листву и лицо мужчины. Она почувствовала, что все это ей знакомо. Это мир, каким он представлялся ей в шестнадцать лет. И вот теперь все исполнилось, и все казалось так просто, так естественно, так соответствовало ее ожиданиям. Весь мир словно говорил ей: иначе и нельзя. Она посмотрела в лицо склонившегося над ней мужчины и ясно ощутила, что из всех виденных ею лиц это было самым...»

«Астма. Предупреждение, диагностика и лечение традиционными и нетрадиционными методами Алла Нестерова 2 Книга Алла Нестерова. Астма. Предупреждение, диагностика и лечение традиционными и нетрадиционными методами скачана с jokibook.ru заходите, у нас всегда м 3 Книга Алла Нестерова. Астма. Предупреждение, диагностика и лечение традиционными и нетрадиционными методами скачана с jokibook.ru заходите, у нас всегда м Алла Викторовна Нестерова Астма. Предупреждение, диагностика и лечение традиционными...»

«ПРИНЦИПЫ НАУЧНОГО МЕНЕДЖМЕНТА Введение Президент Рузвельт в своей приветственной речи, обращенной к губернаторам в Белом доме, пророчески заметил, что сохранение наших национальных богатств является только частностью по отношению к более общему вопросу о производительности национального труда. Вся страна быстро уяснила себе важность сохранения наших материальных богатств, и это послужило началом широкого общественного движения, которое, несомненно приведет к крупным результатам в направлении...»

«БЮЛЛЕТЕНЬ № 26 по вопросам воздухоохранной деятельности (IV квартал 2013 г.) г. Санкт-Петербург 2014 г. Содержание стр. I. Новые нормативные и методические документы в области воздухоохранной деятельности.. 3 II. Ответы специалистов ОАО НИИ Атмосфера на вопросы в области воздухоохранной деятельности. 20 III. Отчеты о мероприятиях.. 22 IV. Информация о предстоящих мероприятиях. 23 2 I. Новые нормативные и методические документы в области воздухоохранной деятельности В 4-м квартале 2013 года...»

«УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС по дисциплине Теория информационных процессов и систем для студентов направления подготовки 230200.62 Учебно-методический комплекс по дисциплине Теория инИнформационные системы У 91 формационных процессов и систем / сост. А. Б. Кузьмичев. – Тольятти : Изд-во ПВГУС, 2013. – 168 с. Для студентов направления подготовки 230200.62 Информационные системы. Одобрено Учебно-методическим Советом университета Составитель Кузьмичев А....»






 
© 2013 www.knigi.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.