WWW.KNIGI.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 10 |

«Введение Изобретение касается рекомбинантного РНК-вируса, предпочтительно парамиксовируса, предпочтительно вируса ньюкаслской болезни (NDV - Newcastle Disease Virus) для ...»

-- [ Страница 1 ] --

013615

Введение

Изобретение касается рекомбинантного РНК-вируса, предпочтительно парамиксовируса, предпочтительно вируса ньюкаслской болезни (NDV - Newcastle Disease Virus) для лечения болезней, в частности для онколитического лечения опухолей. Продуцируются рекомбинантные вирусы, которые кодируют связывающие белки (антитела, молекулы, содержащие анкириновые повторы, пептиды и т.д.), преобразовывающие пролекарство ферменты и/или протеазы и приводят к селективной экспрессии этих молекул, инфицированных вирусом, опухолевыми клетками. Активность этих связывающих белков, преобразовывающих пролекарство ферментов и/или протеаз, увеличивает противоопухолевый эффект вируса.

Дополнительно изобретение описывает изготовление и использование таких модифицированных вирусов для лечения рака.

Описание уровня техники Вирус ньюкаслской болезни.

В целом, использование онколитических вирусов для лечения опухолей рассматривалось в Chiocca (2002). Вирус ньюкаслской болезни использовался в качестве экспериментального терапевтического агента в течение больше чем 40 лет и рассматривался Sinkovics и Horvath (2000). Вирус ньюкаслской болезни в общем описан в книге Alexander (1988). Штамм PV701NDV разрабатывается в качестве противоракового лечения для глиобластомы (Lorence et al., 2003). Штамм MTH68NDV использовался в качестве экспериментального лечения рака и вводился людям в течение больше чем 30 лет (Csatary et al., 2004).

В работе Stojdl et al. (2003) описано, что в диапазоне 80% всех протестированных опухолевых клеточных линий существует дефект в интерфероновом ответе после инфицирования вирусом везикулярного стоматита (VSV - Vesicular Stomatitis Virus). Можно предположить, что подобный процент опухолевых клеточных линий будет восприимчив к инфицированию с помощью NDV, потому что и VSV, и NDV принадлежат к отряду mononegavirales. Также показано, что механизм селективной репликации NDV в опухолевых клетках основан на дефекте в клеточном интерфероновом ответе, направленном против вируса (см., например, US: 20030044384).

Рекомбинантные парамиксовирусы.

ЕР-А-0702085 касается генетически созданных мутантов вирусов инфекционных заболеваний, реплицирирующих несегментированную минус-РНК, содержащих вставку и/или делецию в открытой рамке считывания, псевдогенный участок или интергенный участок вирусного генома.

WO 99/66045 касается генетически модифицированных NDV вирусов, полученных из полноразмерных молекул кДНК вирусного генома.

WO 00/62735 касается способа лечения опухолей, включающего введение чувствительного к интерферону, репликационно-компетентного клонового РНК-вируса, например NDV.

В WO 01/20989 (PCT/US 00/26116) описан способ для лечения пациентов, имеющих опухоль рекомбинантными онколитическими парамиксовирусами. Опухоль сокращается путем введения репликационно-компетентного вируса Paramyxoviridae. Описаны различные способы, которые могут использоваться для создания вирусного генома путем генной инженерии с целью улучшения онколитических свойств.

WO 03/005964 касается рекомбинантного VSV, содержащего нуклеиновую кислоту, кодирующую цитокин.

В US 6699479 описаны мутанты NDV, экспрессирующие V-белок на сниженном уровне и содержащие замены нуклеотидов в локусе редактирования.

US 2004/0170607 касается лечения меланомы путем введения вируса, который не является распространенным человеческим патогеном.

Генетическое конструирование NDV.

NDV можно генетически сконструировать, используя обратную технологию генетики, как описано, например, в ЕР-А-0702085. Например, известно создание рекомбинантных конструкций NDV, содержащих дополнительные нуклеиновые кислоты, кодирующие секретируемую щелочную фосфатазу (Zhao and Peeters, 2003), зеленый флуоресцентный белок (Engel-Herbert et al., 2003), белок VP2 вируса инфекционной бурсальной болезни (Huang et al., 2004), гемагглютинин вируса гриппа (Nakaya et al., 2001) и хлорамфеникол ацетилтрансферазу (Huang et al., 2001) (Krishnamurthy et al., 2000). Ни один из этих рекомбинантных NDV не был сконструирован для использования при лечении болезни человека. Рекомбинантные NDV были созданы для изучения или основной вирусологии NDV, или разработки штаммов вакцин для домашней птицы. Поскольку родительские штаммы вирусов служили лентогенными штаммами NDV, эти штаммы не обладают существенными онколитическими свойствами.

Краткая характеристика изобретения Настоящее изобретение касается РНК-вируса, например NDV, обладающего повышенной онколитической активностью. Более подробно изобретение касается РНК-вируса, особенно вируса ньюкаслской болезни, содержащего рекомбинантную нуклеиновую кислоту, имеющего терапевтическую значимость при лечении рака, в котором нуклеиновая кислота кодирует связывающий белок, преобразовывающий пролекарство фермент и/или протеазу, обладающие терапевтической активностью при экспрессии инфицированной вирусом, опухолевой клеткой.

-1Более предпочтительными являются рекомбинантные онколитические вирусы, например NDV, содержащие один или несколько трансгенов, в котором трансген(ы) кодирует(ют) связывающий белок, преобразовывающий пролекарство фермент и/или протеазу. Возможны комбинации различных специфичностей.

Дополнительно изобретение касается нуклеокапсида рекомбинантного вируса, указанного выше, содержащего вирусную РНК в комплексе с белками капсида, или вирусной РНК и/или РНК, комплементарной вирусной РНК в выделенном виде.

Кроме того, изобретение касается ДНК, например кДНК, кодирующей вирусную РНК, и/или ДНК, комплементарной вирусной РНК. Кроме того, изобретение касается профилактики или лечения опухолевых болезней.

Детальное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения Вирусы.

Изобретение в общем касается РНК-вирусов, предпочтительно минус-РНК-вирусов, более предпочтительно таких вирусов, которые обладают онколитическими свойствами и вместе с этим могут быть созданы с помощью генной инженерии. К таким вирусам относятся парамиксовирусы, предпочтительно вирус ньюкаслской болезни (NDV), вирус кори, вирус паротита, вирус Сендаи;

ортомиксовирусы, предпочтительно вирус гриппа;

рабдовирусы, предпочтительно вирус везикулярного стоматита.

Поэтому предметом настоящего изобретения является рекомбинантный онколитический РНКвирус, содержащий нуклеиновую кислоту по крайней мере с одним трансгеном, в котором нуклеиновая кислота этого трансгена(ов) кодирует связывающий белок, обладающий терапевтической активностью при экспрессии инфицированной вирусом опухолевой клеткой.

Другим предметом настоящего изобретения является рекомбинантный онколитический РНК-вирус, содержащий нуклеиновую кислоту по крайней мере с одним трансгеном, в котором нуклеиновая кислота этого трансгена(ов) кодирует преобразовывающий пролекарство фермент, обладающий терапевтической активностью при экспрессии инфицированной вирусом опухолевой клеткой, предпочтительно в комбинации с соответствующим пролекарством.

Еще одним предметом настоящего изобретения является рекомбинантный онколитический РНКвирус, содержащий нуклеиновую кислоту по крайней мере с одним трансгеном, в котором нуклеиновая кислота этого трансгена(ов) кодирует протеазу, обладающую терапевтической активностью при экспрессии инфицированной вирусом опухолевой клеткой.

Предпочтительно, чтобы вирус согласно настоящему изобретению обладал опухоль-селективным инфицированием, которое приводит к опухоль-селективной экспрессии закодированного трансгена.

Рекомбинантный онколитический вирус согласно настоящему изобретению может содержать по крайней мере один трансгенный ген, независимо выбранный из трансгенов, кодирующих связывающие белки, преобразовывающие пролекарство ферменты и/или протеазы.

Предпочтительно, чтобы вирус согласно настоящему изобретению являлся минус-РНК-вирусом, более предпочтительно парамиксовирусом.

В контексте настоящего изобретения нуклеиновая кислота по крайней мере с одним трансгеном является нуклеиновой кислотой, содержащей ген, который является гетерологичным онколитическому РНК-вирусу, на котором базируется рекомбинантный РНК-вирус согласно настоящему изобретению.

Термин "гетерологичный" касается гена в целом или его части, которая может представлять собой кодирующий участок гена или его часть.

Гетерологичный ген может представлять собой искусственную последовательность или может быть получен из природных источников или путем рекомбинации по крайней мере двух последовательностей, выбранных из последовательностей, полученных из природных источников и/или искусственных последовательностей. "Природные источники" включают животных, таких как млекопитающие, растения, грибы и микроорганизмы, такие как бактерии, простейшие и вирусы, которые могут отличаться от других онколитический РНК-вирусов согласно настоящему изобретению. Трансген может также кодировать слитый белок. К млекопитающим относятся люди и мыши.

В особенно предпочтительном варианте осуществления вирус согласно настоящему изобретению является вирусом ньюкаслской болезни, (NDV), наиболее предпочтительным является штамм МТН NDV. NDV может быть лентогенным, мезогенным или велогенным штаммом. Особенно предпочтительными являются мезогенный или велогенный штаммы NDV. Вирус является предпочтительно компетентным по репликации.

Генетическое конструирование вирусов.

Способы для генетического конструирования РНК-вирусов хорошо известны, как указано выше.

Кроме этого, генетическое конструирование онколитических вирусов рассматривается, например, в Bell et al. (2002). РНК-вирусы в качестве агентов для вирусотерапии рассматриваются в Russell (2002). Содержание какого-либо из этих документов включается авторами путем предоставления ссылки.

Связывающие белки.

-2В онколитическом рекомбинантном РНК-вирусе согласно настоящему изобретению по крайней мере один трансген может кодировать связывающий белок.

Связывающие белки являются белками, которые при экспрессии в клетке-мишени имеют способность к связыванию с компонентом указанной клетки и/или соседней клетки. Предпочтительно связывающие белки - это белки, которые связываются с внутриклеточными компонентами.

В предпочтительном варианте осуществления связывающие белки принадлежат к следующей группе: природный лиганд или генетически модифицированный лиганд, рекомбинантный растворимый домен природного рецептора или его модифицированная версия, например пептид или полипептид-лиганд, молекула антитела и ее фрагменты и производные или подобная антителу молекула и ее производные.

Неполный обзор высокоаффинных связывающих структур приводится Ladner и Ley (2001).

Связывающие белки, как описано выше, могут иметь человеческое, мышиное или близкое происхождение или представлять собой химерную версию, то есть белок, который может быть слитым белком, содержащим последовательности от различных видов, например человека и мыши.

Рекомбинантные связывающие молекулы на основании вышеуказанного описания могут быть мономерными, димерными, тримерными, тетрамерными или мультимерными и биспецифичными или мультиспецифичными.

Предпочтительные связывающие белки выбираются из связывающих белков, обладающих терапевтической активностью.

Природный лиганд, указанный выше, может быть фактором роста или пептидом. Генетически модифицированный лиганд может быть аналогом встречающегося в природе фактора роста или пептида.

Рекомбинантные растворимые домены природного рецептора или его модифицированных версий, указанные выше, являются рекомбинантно экспрессированными растворимыми внеклеточными доменами рецептора поверхности клетки и/или его фрагментами, рекомбинантно экспрессированным растворимым внеклеточным доменом молекулы клеточной адгезии и/или ее фрагментами.



Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 10 |
 


Похожие работы:

«Более 100 рецептов Хорошее настроение - всегда! 1 Содержание Первые блюда Супы с мясом 18 Рыбные супы 9 13 Овощные супы 13 20 Вторые блюда 21 34 Блюда из мяса Блюда из птицы 34 38 Блюда из рыбы 39 46 Овощные блюда 47 55 Выпечка и десерты 56 60 Китайские блюда 61 66 Детское меню 67 72 2 1. Русский борщ Ингредиенты: Говядина - 300 г Вода - 1,5 л Свекла - 1 шт. Репчатый лук - 1 шт. Помидор - 1 шт. Белокочанная капуста - 250 г Картофель - 2 шт. Перец болгарский - 1 шт. Томатная паста - 1 ч. л....»

«Москва, 2011 Оглавление Оглавление Введение Как использовать эту книгу максимально эффективно Системный подход ФОРМУЛА ПРИБЫЛИ Пять ключевых параметров системы, влияющих на размер вашей прибыли.8 Не любите математику, можете не любить, но эту формулу вы просто обязаны выучить наизусть С чего начать? Работаем последовательно, вкладываем по минимуму Планирование, действие, замер, корректировка. Повтор. Увеличение прибыли с продажи. Работаем с маржой Тестирование цены Как заставить клиента...»

«ЛИТОЛОГИЯ и ПАЛЕОГЕОГРАФИЯ Издается с 1973 года Выпуск 5 Сборник научных трудов, посвященный 80-летию профессора Николая Васильевича Логвиненко Под редакцией д-ра геол.-минер, наук, проф. В. Н. Шванова и канд. геол.-минер, наук Э. И. Сергеевой ИЗДАТЕЛЬСТВО С.-ПЕТЕРБУРГСКОГО УНИВЕРСИТЕТА 1997 УДК 552.5 ББК 26.2 JI64 Р е д а к ц и о н н а я к о л л е г и я : Н.Н. Верзилин, В.Н.Шванов (отв. редактор), Э.И. Сергеева (отв. редактор), С.М. Усенков (председатель), Ю.JI. Верба Р е ц е н з е н т ы :...»

«Избранные главы из книги ЗАЖЕЧЬ ОГОНЬ Говорят, что лучше зажечь свечу, чем проклинать тьму. Я думаю, своими первыми десятью книгами я зажег свечу, а может, даже две. Этой, одиннадцатой книгой, я пытаюсь зажечь огонь. 1 ОГЛАВЛЕНИЕ Глава 2 Глава 4 Глава 5 Глава 8 Глава 11 Глава 12 ГЛАВА 2 Никогда не отвечайте на критику. Делая это, вы лишь увеличиваете свою слабость. Старый Человек лежал на спине, у бедняги не было выбора. Мисс Клеопатра уютно устроилась у него на груди, прижавшись головой к...»

«Низами Гянджеви ИСКЕНДЕР-НАМЕ Перевод с фарси – К. Липскерова КНИГАI ШАРАФ-НАМЕ (КНИГА О СЛАВЕ) НАЧАЛО РАССКАЗА И ИЗЛОЖЕНИЕ ИСТИНЫ О РОЖДЕНИИ ИСКЕНДЕРА Воду жизни, о кравчий, лей в чашу мою! Искендера благого я счастье пою. Пусть в душе моей крепнет великая вера В то, что дам сей напиток сынам Искендера! *** Тот, кто царственной книгой порадует вас, Так, свой стих воскрешая, свой начал рассказ: Был властитель румийский. Вседневное счастье К венценосцу свое проявляло участье. Это был всеми...»

«Лысенко В.И. На катамаране с высочайших вершин мира В книге описываются гималайские, каракорумские, кордильерские и другие экспедиции Владимира Лысенко (в Непале, Индии, Пакистане, Китае, Аргентине, Танзании, Перу, США, Италии, Австралии, Индонезии и Эфиопии), во время которых он сплавился на катамаране и плоту по бурным рекам со всех четырнадцати восьмитысячников (в том числе и с Эвереста), став первым человеком в мире, сделавшим это, а также с высочайших вершин всех континентов и Океании...»

«МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ПРИРОДОПОЛЬЗОВАНИЯ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПРИРОДНЫЙ ЗАПОВЕДНИК РДЕЙСКИЙ Утверждаю Директор ГПЗ Рдейский.В.В.Кроликов Тема: Наблюдение явлений и процессов в природном комплексе заповедника и их изучение по программе Летописи природы. ЛЕТОПИСЬ ПРИРОДЫ ЗА 2008 год. Рисунков – 23 Таблиц – 26 Страниц – 172 Зам. директора по научной работе.Завьялов Н.А. Холм, 2009 Летопись природы ГПЗ Рдейский за 2008 год. Том 7...»






 
© 2013 www.knigi.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.