WWW.KNIGI.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 10 |

«Учебно-методический комплекс Дисциплина Биохимия и молекулярная биология Блок дисциплин Б.3.Б3.2 Профессиональный цикл. Направление подготовки 020400.62 Биология ...»

-- [ Страница 6 ] --

3. Качественное определение продуктов гидролиза РНП и ДНП.

а) Белки обнаруживают по биуретовой реакции.

К 0,5 мл раствора белка добавляют 5 капель 10% раствора NaOH хорошо перемешивают, далее прибавляют 1 каплю 1 % раствора CuSO4. Снова тщательно перемешивают. Развивается красно-фиолетовое окрашивание. При малом содержании белка в растворе, чувствительность реакции можно повысить, наслаивая на раствор белка в щелочи 1 каплю 1 % раствора сульфата меди.

б) Пентозу (рибозу) обнаруживают по реакции с орцином или фелинговой жидкостью.

К 1 мл раствора гидролизата приливают равный объем фелинговой жидкости и смесь нагревают до кипения. Образуется красный осадок оксида меди.

в) Дезоксирибозу обнаруживают по реакции с дифениламином.

ДНК обнаруживают по её реакции с дифениламином, который с дезоксирибозой дает синее окрашивание. Рибонуклеиновая кислота (или рибоза), в отличие от ДНК дает с этим реактивом зеленое окрашивание.

В пробирку переносят немного осадка ДНК и растворяют его в 1-2 мл 0,4-% раствора гидроксида натрия. К раствору добавляют равный объем раствора дифениламина и смесь нагревают в кипящей водяной бане около 10-15 мин. Появляется синее окрашивание раствора. В другой пробирке нагревают раствор рибозы (полученный в части первой), к которому добавлено 1-2 мл 0,4-% раствора щелочи г) Обнаружение ДНК.

Реакция с фуксинсернистой кислотой.

ДНК после мягкого кислотного гидролиза при взаимодействии с фуксинсернистой кислотой окрашивается в фиолетовый цвет. В результате кислотного гидролиза происходит распад гликозидных связей с пуриновыми основаниями. Образуется апуриновая ДНК с открытой формой дезоксирибозы, содержащую свободную альдегидную группу. Открытая форма 2-дезоксирибозы вступает в реакцию с фуксинсернистой кислотой по альдегидной группе. Гликозидные связи рибозы, входящие в состав рибонуклеиновой кислоты, не подвергаются гидролизу в тех мягких условиях, в которых он идет у ДНК.

В пробирку берут небольшое количество ДНК или ДНП, добавляют 2 мл 1 н раствора соляной кислоты, нагретой до 600С, и пробирки ставят в водяную баню на мин при 600С. По охлаждении центрифугируют, сливают кислоту и к осадку прибавляют фуксинсернистую кислоту. Через некоторое время появляется фиолетовое окрашивание осадка.

д) Пуриновые основания обнаруживают по их реакции с аммиачным раствором оксида серебра.

К 2 мл гидролизата приливают по каплям крепкий раствор аммиака до щелочной реакции по лакмусу и добавляют равный объем заранее приготовленного аммиачного раствора оксида серебра. Постепенно образуется осадок серебряных солей пуриновых оснований.

е) Фосфорную кислоту обнаруживают с помощью молибдата аммония. К 2 мл раствора молибдата аммония в азотной кислоте прибавляют 1 мл испытуемого раствора. Смесь слегка нагревают. Образуется желто-зеленый осадок фосфоромолибдата аммония (NH4)3PO4·12MoO3.

Контрольные вопросы:

1. Каково отличие ДНК от РНК по химическому строению и выполняемым функциям?

2. Что называют первичной и вторичной структурой нуклеиновых кислот?

3. Какими качественными реакциями можно обнаружить структурные компоненты нуклеотидов?

4. Какова роль свободных нуклеотидов в клетке?

5. Назвать основные типы связей нуклеотидов.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №

Выделение и определение пектиновых веществ в растительном Цель: Формирование ОК- 8 ; ПК-4,5.

Образовательные технологии: Объяснительно-иллюстративные технологии, технология полного усвоения.

Задания для самостоятельной работы студентов:

1.Подготовить доклад или реферат 2.Прочитать учебник:

Биологическая химия. Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина, М: Высшая школа, 2000.

Молекулярная биология. А.С. Коничев, Г.Л. Севастьянова, М: Академия, 2003.

Основы биохимии. Ю.Б. Филиппович, М: Высшая школа, Решение задач на строение белковой молекулы; на молекулярную массу белка; на свойства аминокислот.

Формы контроля самостоятельной работы студентов: устный опрос, анализ рефератов.

Формы текущего контроля знаний и освоенных компетенций: устный опрос, анализ решения задач.

Литература:

1. Биохимия человека. Р. Марри и др., М: Мир, 1993, в 2-х томах 2. Биохимия растений. В.Л. Кретович, М: Высшая школа, 1980, 3. Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка. А.С. Спирин, М:

Высшая школа, 1986.

4. Биохимия. В.П. Комов, В.Н. Шведова. М.: Дрофа, 2004. 638 с.

5. Биохимия и молекулярная биология В. Элиот, Д. Элиот. М.: МАИК, 2002. 446с.

6. Наглядная биохимия. Я. Кольман, К.-Г. Рём. М.: Мир, 2004.

Пектиновые вещества —высокомолекулярные соединения, широко распространенные в растениях. Относительная молекулярная масса пектиновых веществ колеблется от 000 до 300 000. "Они являются цементирующими соединениями, своего рода клеем, скрепляющим растительные клетки; благодаря своим гидрофильным свойствам предохраняют растения от высыхания, положительно влияют на засухоустойчивость и обеспечивают тургор.

Главная часть пектиновых веществ – полигалактуроновая кислота:

Метилированная по карбоксильной группе полигалактуроновая кислота называется пектиновой кислотой или растворимым пектином. Характерным свойством пектина является его способность давать студни в присутствии кислоты и сахара. Это свойство широко используется в кондитерской промышленности.

Цель работы. Выделить пектиновые вещества из яблок.

Задачи.

1. Выделить растворимый пектин из яблок.

2. Определить количество растворимого пектина по пектату кальция Ход работы.

Оборудование, реактивы. Шкаф сушильный; центрифуга; баня водяная; пипетка с одной меткой на 25 мл; колбы мерные на 250 и 500 мл; ступка фарфоровая (диаметр мм); колба коническая на 500 мл с притертым холодильником; стаканчик для взвешивания (бюкс); уксусная кислота (1 н.); гидроксид натрия (0,1 н ); хлорид кальция (2 н ); нитрат серебра (1%-ный); песок кварцевый.

Выделение растворимого пектина 25 г свежего материала (яблоки, сахарная свекла) растирают с битым стеклом или кварцевым песком в фарфоровой ступке до однородной массы, переносят в коническую колбу на 500 мл, заливают 100 мл воды, нагретой до 45°С (не выше), и выдерживают (при периодическом взбалтывании) 30 мин при этой же температуре на водяной бане. Затем колбу плотно закрывают пробкой и энергично взбалтывают 15—20 мин. После этого содержимое колбы центрифугируют при 3000 g в течение 10—15 мин и собирают прозрачный раствор пектина. Для обеспечения полноты извлечения растворимого пектина осадок повторно заливают 75 мл воды и получают второй экстракт; в третий раз заливают 50—60 мл воды, каждый раз отделяя растворимый пектин от осадка центрифугированием.

Экстракты объединяют, доводя их общий объем до 250 мл. Растворимый пектин определяют пектатным методом (см. ниже).

Определение количества растворимого пектина по пектату кальция Для количественного определения пектина часто пользуются методом, основанным на гидролизе пектиновых веществ и осаждении полигалактуроновой кислоты в виде пектата кальция.

В коническую колбу или химический стакан емкостью 500 мл отмеряют пипеткой мл раствора пектина (см. выше) и приливают 100 мл 0,1 н. раствора гидроксида нагрия.

Оставляют на 30 мин для омыления растворимого пектина, который переходит в натриевую соль пектиновой кислоты. Затем добавляют 50 мл 1 н. раствора уксусной кислоты и получают свободную пектиновую (полигалактуроновую) кислоту. К полученной таким образом пектиновой кислоте через 5 мин прибавляют 50 мл 2 н. раствора хлорида кальция и оставляют стоять 1 ч. За это время выпадает осадок пектата кальция. Осадок промывают горячей водой на взвешенном фильтре (фильтр предварительно многократно промывают водой и высушивают до постоянной массы в сушильном шкафу при 100°С) до тех пор, пока не станет отрицательной реакция на хлорид-ион с 1%-ным раствором нитрата серебра. Осадок вместе с фильтром помещают в бюкс и доводят до постоянной массы в сушильном шкафу при 100°С. По разнице между первоначальной массой фильтра и массой его с пектатом кальция находят содержание последнего в 25 мл раствора пектата.

Содержание пектиновой кислоты вычисляют по формуле:

где С — содержание пектиновой кислоты (в %); х — количество найденного пектата кальция (в г); а — навеска исследуемого растительного материала (в г); V1, — объем фильтрата, взятого для омыления и осаждения в нем пектата кальция (в мл); V — начальный объем раствора пектина (в мл); 92 — коэффициент пересчета (в %), вычисленный исходя из того, что пектат кальция содержит 8% кальция.

Контрольные вопросы:

1. Дать характеристику углеводам живых организмов и их биологической роли.

2. В чем сходство и различие в строении крахмала и гликогена?

3. Как можно определить содержание глюкозы в крови животных?

4. Как объяснить снижение сахара в крови после введения инсулина?

5. Почему после введения адреналина содержание сахара в крови увеличивается?

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №

Цель: Формирование ОК- 8 ; ПК-4,5.

Образовательные технологии: Объяснительно-иллюстративные технологии, технология полного усвоения.

Задания для самостоятельной работы студентов:

1.Подготовить доклад или реферат 2.Прочитать учебник:

Биологическая химия. Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина, М: Высшая школа, 2000.

Молекулярная биология. А.С. Коничев, Г.Л. Севастьянова, М: Академия, 2003.

Основы биохимии. Ю.Б. Филиппович, М: Высшая школа, Решение задач на строение белковой молекулы; на молекулярную массу белка; на свойства аминокислот.

Формы контроля самостоятельной работы студентов: устный опрос, анализ рефератов.

Формы текущего контроля знаний и освоенных компетенций: устный опрос, анализ решения задач.

Литература:

1. Биохимия человека. Р. Марри и др., М: Мир, 1993, в 2-х томах 2. Биохимия растений. В.Л. Кретович, М: Высшая школа, 1980, 3. Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка. А.С. Спирин, М:

Высшая школа, 1986.

4. Биохимия. В.П. Комов, В.Н. Шведова. М.: Дрофа, 2004. 638 с.

5. Биохимия и молекулярная биология В. Элиот, Д. Элиот. М.: МАИК, 2002. 446с.

6. Наглядная биохимия. Я. Кольман, К.-Г. Рём. М.: Мир, 2004.

Цель работы. Обнаружить наличие гликогена в животном материале.

Задачи.



Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 10 |
 


Похожие работы:

«Бычинин Михаил Владимирович Инвазивный мониторинг центральной гемодинамики при критических состояниях у больных с заболеваниями системы крови 14.01.21 – гематология и переливание крови 14.01.20 – анестезиология и реаниматология АФТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва - 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель: Галстян...»

«ГОДОВОЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ ОТЧЁТ ПО ПРОЕКТУ МНТЦ 2097 РАДИНФО РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНОЙ ИНФОРМАЦИОННОЙ СИСТЕМЫ, ВКЛЮЧАЮЩЕЙ БАЗУ МЕТАДАННЫХ И РЕГИОНАЛЬНЫЕ РАДИОЭКОЛОГИЧЕСКИЕ КАДАСТРЫ ДЛЯ ОЦЕНКИ РАДИАЦИОННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ОКРУЖАЮЩУЮ СРЕДУ И НАСЕЛЕНИЕ Аналитическое исследование Северо-Запада России и Красноярского региона ВТОРОЙ ГОД (с 01 августа 2003 г по 31 июля 2004 г) Научный соруководитель проекта Н.П. Лаверов Научный соруководитель проекта В.А.Лебедев Директор ФГУП ВНИИХТ В.В.Шаталов Руководитель...»

«3 СИНТЕЗ И СВОЙСТВА 1-(-АЗИДОАЛКИЛ)-4,9-ДИОКСОНАФТО [2,3-d]-ТРИАЗОЛ-2-ОКСИДОВ М.Ю. Биче-оол, А.А. Мыжылай, А.С. Кузнецова, М.Н. Зверева Красноярский государственный педагогический университет им. В.П. Астафьева Научный руководитель: Л.М. Горностаев, д-р хим. наук, профессор Нафтотриазолоксиды (I) обладают биологической активностью, например, некоторые из них проявляют противовоспалительные свойства [1]. Как известно, разработанная в последние годы методология связывания биологически активных...»

«Вторая индустриализация России Настольная книга руководителя государства (основы теории и практики осуществления) под редакцией д.э.н., профессора Н.А. Потехина Уральский рабочий Екатеринбург 2011 2 УДК 008.2 : 007.338.984 ББК 65.9(2Рос) В87 Коллектив авторов: Н.А. Потехин, доктор экономических наук, профессор, В.М. Капустян, кандидат технических наук, профессор, В.Н. Потехин, кандидат экономических наук, М.Ю. Русаков, кандидат экономических наук. Вторая индустриализация России. Настольная...»

«Допущено Учебно-методическим объединением по классическому университетскому образованию в качестве учебного пособия для студентов высших учебных заведений, обучающихся по направлению 020400 Биология и техническим специальностям Москва 2014 УДК 574:4(075.8) ББК 28.08 Э40 А в т о р ы: М.Н. Корсак, С.А. Мошаров, А.П. Пестряков, М.И. Кроленко, Е.В. Титов Р е ц е н з е н т ы: член-корр. РАН А.Л. Верещака; член-корр. РАМН Е.Н. Беляев Экология : учеб. пособие / [М. Н. Корсак, С. А. Мошаров, Э40 А. П....»

«Организация внеклассных экспериментальных исследований Ж.А.Цобкало, магистр естественных наук, учитель химии СШ № 83 г. Минска; Д.И.Мычко, кандидат химических наук, доцент кафедры неорганической химии Отличительной чертой современного этапа развития школьного химического образования является изменение приоритетов в целях образования. В центр учебно воспитательного про цесса ставится задача обучения умению применять знания в незнакомой ситуации и для ре шения нового круга задач, обучение умению...»

«Крупкин А. Б., Степанов В. В., Саенко С. А., Ковыгин Г. Ф., Дохов М. А., Матвеев К. М., Горохов Н. В. Федеральное государственное унитарное предприятие научно-исследовательский институт промышленной и морской медицины Федерального медико-биологического агентства (ФГУП НИИ ПММ) 196143, г. Санкт-Петербург, пр. Юрия Гагарина, д.65 телефон (812) 415-94-30, (812) 415-94-31; факс: (812) 415-94-58 E-mail: niipmm@fmbamail.ru Резюме. Проведено изучение комплекса вредных производственных факторов на...»

«Утверждаю: Ректор И.А. Носков 2011_ г. Основная образовательная программа высшего профессионального образования Направление подготовки 020100.62 -Химия Квалификация Бакалавр Самара 2011 г. 1. Общие положения 1.1. Основная образовательная программа высшего профессионального образования (ООП ВПО) по направлению подготовки 020100.62 Химия (бакалавр) является системой учебно-методических документов, сформированной на основе положений Федерального закона № 309 – ФЗ О внесении изменений в отдельные...»

«Кафедра химии БИОХИМИЯ С ОСНОВАМИ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ СД(М).Ф.6 УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС ДИСЦИПЛИНЫ Направление 050100.62 Естественнонаучное образование Профиль Химия (Квалификация: Бакалавр естественнонаучного образования) КРАСНОЯРСК 2011 УМКД составлен к.х.н., доцентом Г.И. Золотаревой, ст. преп. В.А. Бересневым Обсуждён на заседании кафедры химии: 06 мая 2009 г., протокол №12 Заведующий кафедрой Л.М. Горностаев Одобрено научно-методическим советом специальности: 04 июня 2009 г....»






 
© 2013 www.knigi.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.